高效液相色譜儀過濾技巧

任何顆粒物進進高效液相色譜儀后都會在柱子進口端被篩板擋住，后的結果是將柱子堵塞，表現出的特征是系統壓力增加并使色譜峰不變形。因此，要采取各種預防措施，包括操縱步驟和商品儀器自身的各種過濾設計，努力防止或減少顆粒物進進高效液相色譜儀中，從而延長儀器和色譜柱的使用壽命，并進步數據的可靠性。

在高效液相色譜儀中，顆粒物的主要來源有三個途徑：活動相、被測樣品和儀器系統部件的磨損物?！　　　?、被測樣品　　使用針筒式過濾器不可能100%得到通過過濾器的被測樣品，總會或多或少的丟失。丟失來自這樣幾方面：過濾器濾膜的吸附、過濾器濾出的顆粒物上的吸附、針筒式濾膜過濾器與針筒連接處的滲漏等。　　　　2、活動相　　　　無論是高效液相色譜儀HPLC級的水還是在實驗室使用超純水凈化系統制備的水，后一步也是通過0.2μm微孔濾膜。任何一種緩沖液中加進了固體物，必然活動相過濾將。少量雜質顆粒存在于活動相中必然成為殘渣?！　　　〗鉀Q辦法：2. 1.活動相制備僅采用HPLC級液體時不需要過濾，反之所有活動相組成在使用前必須過濾?！　　　?.2在連接儲液瓶和泵的輸液管的末端進口采用下沉式過濾器（常見材質有熔融玻璃砂芯濾板和微孔金屬的兩種）也是很重要的。這個過濾器的規格為≥10μm的微孔物質，所以它不能取代活動相過濾步驟，但是它能除往系統中的塵土并保證儲液瓶、輸液管使用的可靠性?！　?.3.推薦在HPLC系統中采用一個0.45或0.5μm的在線多孔過濾器，接在自動進樣器和柱子之間，即使已使用了保護柱。這個在線過濾器將成為擋板代替柱頭的濾板，而且如采用一個玻璃砂芯濾板，既便宜，更換又方便（幾分鐘就可更換）。若采用在線過濾，高效液相色譜儀檢測每批樣品開始前記錄下壓力值，當壓力上升一定值，例如25%或增加500psi，應該更換玻璃砂芯濾板了，更換以后沖洗幾分鐘系統將恢復到原來的壓力值。

3、儀器系統部件的磨損物　　　　后，在高效液相色譜儀HPLC系統中顆粒物的另一個主要來源是輸液泵密封墊和進樣閥旋轉軸的磨損。關于輸液泵密封墊的磨損更換有兩種不同建議。　　3.1、在一般實驗室中輸液泵密封墊通常使用壽命為六個月到一年，因此建議半年或一年更換這些密封墊。　　3.2、原裝密封墊的密封效果好，更換以后輕易引起活動相滲漏。所以，只要不漏液就不要輕易更換密封墊。